挫折文字材料是每-在37◦形成;C为1 h使用任意行动hexamer初步知识(3,6µg)右手击球员的左后方场地1µg的总计RNA在朝派a 25µl反作用混合物控制感情0.5 mM每一的a dNTPs混合1×第一搁浅缓冲存储器1 U/µlRnasin核糖核酸酶inhib-石山和8 U/µlM-MLV逆转录酶(倾向-许多)的-.实时-PCR was出去一iCycler iQTM((BIO-RAD)继续进行.半定量的PCR细察履行右手击球员的左后方场地是一RT反作用的1/50稀释((5µl)使用SYBER-格林PCR主人混杂体((Eurogentec).PCR反作用的总容量随着300nM的每一个初步知识是20µl.热的循环礼仪是95◦在10分钟中C偏于随着40系列PCR到来95◦C 30,60◦C1分钟.每一初步知识设定的PCR反作用为的效率被在有关同样的cDNA样品的顺序稀释三个相似物之一中测量和排列从80到100%.
per-formed逆转录是在37◦C 1小时采用随机hexamer底漆(1月µg桑普拉斯的µg)在25µl总RNA反应混合物的0.5毫米的每一dNTPs×第一股混合,1 /µl缓冲区,1型Rnasin ribonuclease inhib-tor、8你/µl M-MLV逆转录酶(亲巨型)。本篇iCycler进行了iQTM(BIO-RAD)。定量PCR技术进行了分析µl稀释(5)制定的使用SYBER-Green RT反应PCR主人的混合物(Eurogentec)。PCR反应总量与300nM 20µl各底漆。热循环协议是95◦C为10分钟,紧随其后的是40个周期(95%◦PCR 30,60◦丙1分钟)。PCR反应效率为每一组被测量涂上相同的一序列稀释样品,并从80 ~ 100%。