求教：神经纤维免疫组化染色

问标本固定的基本原则是什么？

1.不能损伤细胞形态；

2.固定后应保持细胞膜的通透性，以允许抗体进入与抗原结合。

3.不能损伤细胞内的抗原；

4.不能凝集蛋白质；

问常用抗原物质的固定方法的最佳选择是什么？

1.丙酮的作用是溶解膜磷脂，所有的脂质双层（胞膜、核膜、细胞器膜等）已被破坏，但蛋白和多糖类不受影响。而丙酮固定后不需进行抗原修复，它是一种非交联固定剂。

2.多聚甲醛固定对酶类和脂类保护的好，易与蛋白发生交联，所以一般经过甲醛或PFA固定后的标本一般需要抗原修复。

3.蛋白质抗原：95%～100%乙醇；

4.酶、激素：丙酮；

5.病毒：  丙酮、四氯化碳、无水乙醇；

6.多糖、细菌等：微火加热，甲醇、10%甲醛、丙酮；

7.类脂（异嗜性抗原）：10%甲醛，10%佛茂尔（ForMol）；

8.免疫球蛋白：四氯化碳。

问固定的步骤有哪些（包括固定时间、条件等）？

（1）切片后的组织细胞固定：一般室温5~10min，4度30~60min。

（2）切片前的组织固定：一般石蜡切片前需对组织进行固定，多为12~24h。

问为什么在免疫组化中标本要进行固定？

1.除去防碍抗原—抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；

2.固定的标本易于保存。

3.防止标本从玻片上脱落；

可做NF、NSE、S－100、Syn。NF：神经细丝（neurofilaments, NF）分布于神经纤维