自然界中几乎所有的微生物都混合在一起。为了观察、研究和利用微生物,必须将其与各种微生物的环境相分离。因此,微生物分离是一项非常重要的技术。微生物分离的基本方法之一,有很多方法,有连续稀释分离法、平板色谱分离法和单细胞分离法。其中,单细胞分离法要求昂贵的精密仪器,高中不能进行,而连续稀释分离法和板线分离法简单易行,完全有条件进行中学办学条件。这两种方法描述如下。1连续稀释分离法取1克土样,在火焰侧用无菌瓶灌满99毫克水,充分摇匀,细菌分散。用吸管吸取菌悬液1毫升,放入试管装无菌水9毫升,并进一步稀释成1000倍,即10-3悬浮。稀释10倍稀释法(稀释浓度为每1次,必须更换吸管)。取1毫升吸管,3毫升分别从10-8、10-7、10-6菌悬液吸收的悬浮液,1毫升分别为10-8数、10-7、10-6在培养皿中,也同样重复做3菜。温度为45℃~50℃的营养琼脂培养基(其组成和制备方法请参考第三章)入菜,轻轻旋转菌悬液充分混合,凝固后,这道菜是反放在温暖的地方(28摄氏度),每日观察培养基表面没有微生物菌落。经过一定时期培养培养基菌落生长后,根据菌落特性,初步判断微生物种类,并在显微镜下观察,如果形态一致,可以认为是初步分离纯培养。纯培养物的分离将由平板培养基转入试管、试管斜面培养基。2板线分离法取1克土样,在火焰附近用无菌瓶灌满99毫升无菌水,塞上棉花塞,制成悬浮菌。第二,取培养皿置于实验阶段,左手将培养皿打开,一盘营养注入固体溶化培养基10~12毫升,轻轻转动培养皿,培养基均匀分布,平放在台面上,胶结板。然后在锅底用蜡笔师A、B、C、D几个区域。连续生产多种平板培养。培养皿的底部用拇指和无名指固定在倾斜状态。同时,随着环接种针把小火在菌悬液,迅速成菜,盘子中,第一平行线6 ~ 7,旋转盘约70°的接种针烧冷却,通过第二平行交叉划线部分的第一次,然后用同样的方法第三平行线。划线时,应使基材表面平整,以免落入空气中。接种针应与钢板表面约30度。不要将针头暴露在培养皿的边缘,或切开培养基。该菜倒盘后在28度左右倒温处进行训练,将细菌生长后,鉴定微生物种群,并根据检测结果,确定是否分离出纯培养物。如果菌株很纯,可以转入斜面培养基进行进一步培养。连续稀释分离法和平板法,必须在无菌室进行或接种。二、从1种土壤中分离出的各种微生物好氧兼兼性厌氧菌的分离方法见“分离”的2种基本方法从土壤中产生的放线菌分离出高达1的培养基,同时热入菜盘、胶结板、预留。取10克土,放入瓶中含无菌水约100毫升的锥,并加入10%滴酚10滴以抑制细菌的生长。10分钟振荡,使10-1悬浮。根据连续稀释分离法,进一步制备了10-3菌悬液。用吸管吸取0.1毫升10-3悬挂,并将其插入到平板培养基,然后用无菌玻璃刮刀均匀的菌悬液在整个培养基。培养皿在25~30℃的培养箱中翻转,为期7~10天。如果菌落硬度大,干燥致密,与基质紧密相连,而不是EA