路过。顺便说一句话。在这个忙碌的时代,没有人拿出这么多的时间来给你翻译这么多。网上给你翻译了一下。希望对你有帮助。
分子生物学技术
叶样品脱水的SiO2为一周之前,基因组DNA extraction.the DNA的准备,作为前面所述,但使用不同的提取缓冲液( 100 mmol /升三-盐酸( pH值8.0 ) , 50 mmol /升的EDTA , 500 mmol / L的氯化钠, 2 %的SDS (瓦特/ V )的1 % ,外汇交易同步交收- 40 , 1 % , β - mercaptoethano1 ) 。
聚合酶链式反应( PCR )进行了在反应体积50 μ升含有10ng模板DNA , 0.4 mmol / L的每两个基因的特异性引物, 200 μ mol / L的每4 dntp ' , 5 μ升10xpcr缓冲液( 100 mmol /升三-盐酸( pH值8.3 ) , 500mmol /升氯化钾, 20 mmol / L的氯化镁, 0.1 % (瓦特/ V )的明胶) , 2.5单位的基因Taq聚合酶对一珀金-埃尔默9600 DNA的热cycler按照以下程序: 94业主立案法团, 3分钟为初始变性,其次是35周期的变性94 ℃ 30秒,退火( 59 ℃ ,考克斯ⅲ , 55oc为trnl 〜 trnf )升民,延长在72 ℃升min和30秒,终止72 ℃ 10 min.one对引物为特定的线粒体基因考克斯ⅲ或一双引为叶绿体trnl 〜 trnf地区能够健全相应的MT -或叶绿体DNA地区取自序列公布Wang等al.the考克斯ⅲ引物是5'ggtagatccaagtccatggc3 ' , 5'cagtaccatgcagctgcttc3 '和trnl 〜 trnf地区5'cgaaatcggtagacgctacg3 '和5'atttgaactggtgacacgag3 ' , 5 μ升出总50 μ升PCR产物的分离, 0.8 %琼脂糖凝胶电泳和染色ethidium bromide.the其余的聚合酶链反应prcducts纯化使用wizardtm的PCR preps DNA纯化系统试剂盒( promega ) 。
纯化的PCR产物( 8 μ升)消化后由算术逻辑单元,我的DDE ,我hinf ,微型和小型企业的RSA我或我分离, 6 %非变性聚丙烯gels.the限制性片段模式的可视化,由银染法凝胶是固定的在10 %乙酸为20分钟,银染30分钟在0.1 %的硝酸银和0.15甲醛( 37 % ) ,和形象发展,在解决3 % na2c03 , 0.15 %甲醛( 37 % )和0.02 % ,硫代硫酸钠( 10 mg / mL ) 3 〜 5分钟。