求大神帮忙翻译一下,急用

2024-12-20 19:46:13
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回答1:

2.5。蛋白质含量和分子量的测定
变性凝胶电泳(SDS–页)是根据bizani等人进行的。(2005)。不连续系统由两丙烯酰胺凝胶,分离凝胶(15%丙烯酰胺)和浓缩胶(4%丙烯酰胺),和一个运行缓冲液(三–甘氨酸–SDS)。对每个提取的样品制备5 LG被稀释在加载缓冲区5会6(5)加入蒸馏水,达到最后一卷50米的样品孵育5分钟,在95℃以利于蛋白质的变性。凝胶运行在100 V,在室温下的2小时。的凝胶孵育2小时,在溶液中的25%的甲醇,10%乙酸和0.03%的甲醛来固定的蛋白质。然后用30%乙醇洗涤3次,用20分钟。洗涤凝胶孵育1分钟,在一个黑暗的0.01%硫代硫酸钠溶液。去除剩余的硫代硫酸钠,凝胶冲洗三次蒸馏水和孵育20分钟在黑暗中硝酸银和0.14% 0.2%甲醛溶液;银溶液用三次蒸馏水去除。发展是用6%碳酸钠溶液进行的,0.03%的甲醛和0.03%硫代硫酸钠;凝胶搅拌直到带看,反应和25%甲醇和10%的乙酸溶液停止。通过一个标准的Rf对已知样本logmw曲线绘制测定蜂蜜样品的多肽的相对分子量(阶梯),然后读取样品的logmw后测量距离在同一凝胶迁移。
望采纳,谢谢。