基因组DNA做PCR时,最下面很亮的带是什么啊

2024-12-17 09:46:53
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回答1:

不是引物二聚体就是RNA,RNA没有处理干净,我也经常用genomic DNA跑PCR鉴定转基因植物,建议你加DMSO跑,提高退火温度 应该可以排除二聚体和RNA的可能delia1013(站内联系TA)就是引物二聚体啊,我拿酵母cDNA批的时候也这样,目的条带比较淡,下面最亮的就是引物聚合了,不用管啦~~切你的带就可以啦~~heismeng(站内联系TA)dimerzhuifeng7000(站内联系TA)最下面的肯定是引物二聚体,基因组DNA怎么会是单条带呢?caoliang38(站内联系TA)你的条带太亮了吧 EB加多少啊695(站内联系TA)引物二聚体xhlxhl(站内联系TA)是引物二聚体的,因为随后一个阴性很亮~~ 不是软件设计没有二聚体就一定不会有的fykxy_206(站内联系TA)marker 最后一个条带是多大?stickfrom(站内联系TA)对啊,你用的maker几啊?我觉得可能是引物二聚体。luckyan110(站内联系TA)低于100bp都是引物二聚体 挺常见的sihuanchen(站内联系TA)提高退火温度为什么可以避免引物二聚体产生呢?rava(站内联系TA)相当常见,dimer或hairpin等二级结构的引物容易产生这种条带,软件设计没有dimer、crossdimer等只是表明这对引物有利于扩出目标条带。不需要管,提高退火温度照样有。非特异性带跟引物设计和PCR条件都有关,先调条件再改引物吧,你引物浓度太高或者循环数过多必居其一。
相当常见,dimer或hairpin等二级结构的引物容易产生这种条带,软件设计没有dimer、crossdimer等只是表明这对引物有利于扩出目标条带。不需要管,提高退火温度照样有。非特异性带跟引物设计和PCR条件都有关,先调条 ... 引物在体系中的浓度是1uM,可能有点高把w.king124(站内联系TA)Originally posted by stickfrom at 2009-10-17 08:58:
对啊,你用的maker几啊?我觉得可能是引物二聚体。 DL2000的Marker,最下面的是100bphuzhihong-(站内联系TA)一直不明白这个原因,请教一下jjlbest(站内联系TA)是引物二聚体,因为你最后的那个泳道没有模板也出现该条带,说明是引物二聚体。fungi1205(站内联系TA)引物二聚体~~~~~~~~~~