首先得下载安装一个primer5 的软件，网上百度搜索后即可下载获得
点击File下拉菜单，选择New，然后选择DNA Sequence
从word文件中copy目标序列，然后control+V到primer5的文本框中，选择As is，点击OK。
设计引物前得进行酶切位点分析，所以要点击Enzyme按钮，选择Add添加目标酶，然后点击OK进行分析检测
完成上面之后，我们开始点击primer选项设计引物
点击S/A，分别代表设计上游/下游引物，这里我们就点击S为例来设计上游引物
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设计好之后往往需要根据作者的需要进行编辑，这时就点击Edit primers，然后出现以下界面，作者就可以进行编辑修改了，这样就基本完成获得你所需要的引物了
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