1 可能是太弱你看不出来，建议用His抗体做个western 看看是不是有条带而看不出。2 是不是融解性太差，建议将你的氨基酸序列做个疏水性分析。如果确实如此的话可能要重新构载体
换个载体试试，是经常有这种情况的，怎么表达都表达出来，换个载体就表达出来了，你可以试下
有可能是表达量太小，先做个WB验证下IPTG浓度感觉有点大，我们实验室最大不超过1mM,一般是0.2mM。如果可以还是换个载体，感觉28a不怎么好纯化
