实时荧光定量PCR 引物与普通PCR一样吗

两者间用的引物有什么区别,可以用一样的序列去设计吗
2024-12-21 20:09:47
推荐回答(3个)
回答1:

实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能准确的计量模板量了,这样就失去了实时定量的意义了

回答2:

不是一回事 荧光PCR是为了检测mRNA表达水平 所以只要在整条mRNA上选取特异性好的一段两百bp左右的序列扩增就可以了 普通PCR是为了扩增特定的片段或者基因 设计在哪是要看你需要扩增哪部分的

回答3:

荧光是定量判定起始模板浓度的..跟普通PCR引物是一样的 不同的只是反应中加入了探针或者燃料用于实时监控~!