94 2min94 20sec, 50-60 20sec, 68/72(pfu 68, taq 72) Xmin(pfu 500bp/min, taq 1kb/min), 25-40cyc (用于装载体，作转基因的，25cyc以减少突变可能性；用于检测，genotyping的，可以用35-40cyc)68/72 8-10min用于装载体的，要用高保真的酶，如pfu， 一般检测用taq就可以了。
