用DNS法测发酵液中残糖量的具体步骤 哪位能告诉我用DNS法测发酵液中残糖量的具体步骤??急用!!十分感谢

2024-12-22 00:46:02
推荐回答(2个)
回答1:

用DNS法测发酵液中残糖量的具体步骤如下:
1. 准备DNS试剂:将6.3克DNS和262ml 2mol/L氢氧化钠,加到500ml含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中,再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加水定容到1000ml,即制成3,5-二硝基水杨酸试剂,贮于棕色瓶中备用。
2. 制作标准曲线:用已知浓度的标准葡萄糖溶液系列进行DNS比色测定,将葡萄糖浓度与DNS试剂的吸光度进行线性回归,获得标准曲线。
3. 发酵液处理:取发酵液样品适量,加入一定量的DNS试剂,沸水浴煮沸5分钟,进行充分的糖类氧化。
4. 比色测定:将处理后的样品进行适当稀释,使其在最大波长处的吸光度在0.2-0.8之间。在比色皿中加入适量样品,放入分光光度计中,在最大波长处测定DNS试剂的吸光度。
5. 计算:根据测定的吸光度和标准曲线,即可计算出样品中的残糖量。
请注意,这些步骤仅供参考,实际操作可能需要根据具体实验条件和要求进行调整。如有需要,建议咨询专业技术人员或相关领域的专家。

回答2:

DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的。因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关,而对还原糖的种类没有选择性,故DNS方法适合用在多糖(如纤维素、半纤维素和淀粉等)水解产生的多种还原糖体系中。
将6.3克DNS和262ml 2mol/L氢氧化钠,加到500ml含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中,再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加水定容到1000ml,即制成3,5-二硝基水杨酸试剂,贮于棕色瓶中备用。
编辑本段葡萄糖标准曲线的绘制
别取葡萄糖标准液(1mg/ml)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml于25 ml试管中,分别准确加入DNS试剂2ml,加9ml蒸馏水,沸水浴加热3min,流水冷却,定容。在540nm波长下测定吸光度。
编辑本段样品的测定
样品液适当稀释,使糖浓度为0.1-1.0mg/ml,取稀释后的糖液1.0ml于15ml刻度试管中,加DNS试剂2.0ml,沸水煮沸2min,冷却后用水补足到15ml刻度,在540nm波长下测定光密度。从标准曲线查出葡萄糖mg/ml数。求出样品中糖含量。