需要用其基因中段一段已知序列作为3‘端引物,以mRNA为模板,逆转录做5’端RACE(Rapid amplification of cDNA End,如果不知道原理自己去查,太多不好解释),将扩增产物连接入质粒载体测序,其测序结果5'端即为转录起始位点。通常在真核生物中,转录起始位点距ATG翻译起始位点上游100bp左右,包含明显的TATA box序列。
1 引物延伸实验(primer extension experiment)
2 核酸酶S1作图(Mapping RNA with Nuclease S1)
3 5'RACE 加预测