获取目的基因，要知道转录版本全长，然后设计上下游引物。检测目的基因表达，只要设计上下游引物，扩增基因的100--200个碱基就可以了。或者你的提问本身有问题，基因碱基是互补的，知道一条，就可以设计上下游引物。
如果你不知道模版的序列，你的引物又如何设计呢？当然随机引物也可以，但是那样得到的产物不纯，而且是否是你所需的目的产物也不可知。
知道一段目的基因的核酸序列，就可以设计上下游引物，引物基因的两条链是互补的。
