白三叶草花叶病毒病病毒提纯方法有几种?

2024-12-16 05:37:58
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方法1:从菜豆病叶中榨取汁液,然后加入抗坏血酸至0.2%的量,再加入亚硫酸钠同样至0.2%的浓度。加入等量的乙醚后振荡,低速离心,并除去乙醚相。在水相中加入等量的四氯化碳后进行振荡,低速离心并除去四氯化碳相,并重复一次此步骤。将澄清后液体在4℃下过夜。经过两次高速和低速组合进行沉淀和澄清,将高速离心后获得的沉淀粒子重新溶于0.01mol/L的磷酸缓冲液(pH7)中。详细参见Wetter,Arch.Mikrobiol.37:278,1960。方法2:切碎冷冻的病组织,融化后加入0.1mol/L的K2HPO4从组织中获得带病毒的汁液。通过3次低速和高速组合的差速离心进行澄清和沉淀,将最后1次高速离心后获得的沉淀物溶于蒸馏水中。加入1/2容量的硫酸铵或1mol/L的乙酸(pH4.5)就可以沉淀获得病毒粒子。