如果没有杂带,只是目的条带不亮,就不是特异性问题,而是扩增效率较低。可能是引物结合不好,或者两个引物退火温度差异过大等原因。可以先试一试降低退火温度,增加循环数。提高模板浓度,或回收后再次扩增也可以试一试。如果要求不是很高,这样优化一下就差不多了。
那就要问你怎么设计的引物咯设计没有办法优化的话就增加模板的用量,减少Taq和引物的量。还有,既然你有目的条带,割胶回收一下,再拿这点DNA做二次PCR,特异性会好点。
引物不特异呗