pbr322质粒是一种什么样的载体粘粒质粒噬菌体

2024-12-11 16:53:31
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pbr322质粒是一种什么样的载体粘粒质粒噬菌体
载体种类:质粒、噬菌体、腺病毒载体、逆转录病毒载体 质粒特点: 存在于细菌染色体外的小型环状DNA分子。 具有自我复制功能。 带有抗性基因及表型识别等遗传性标记物。 经改造后具有多克隆位点。 举例:pMD-18T质粒、pUCl9质粒、pBR322质粒等
在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体.人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体,如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等.常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101.pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr),并含有27种限制性内切酶的单一识别位点.如果将DNA片段插入EcoRI切点,不会影响两个抗生素基因的表达.但是如果将DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切点,就会使抗四环素基因失活.这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感.没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感.pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点.质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对). 1973年,科学家将质粒作为基因的载体使用,为基因工程的诞生奠定了基础.最常用的质粒是大肠杆菌的质粒.这种质粒常含有抗生素抗性基因,例如,卡那霉素抗性基因