两种菌丝如何辨别？怎样组合成一级种？

在银耳纯白菌丝和耳友菌丝分离中，常因分离技术不同而效果不同。无非是下列几种结果：①银耳纯白菌丝；②羽毛状耳友菌丝；③银耳纯白菌丝和耳友菌丝；④酵母状分生孢子和耳友菌丝。如果有杂菌干扰，情况就更复杂了。为了得到有生产价值的菌种，在分离时必须每天观察，才能判定纯白菌丝或羽毛状耳友菌丝是否已单独分离。

（1）掌握两种菌丝特征

①银耳纯白菌丝的特征。白色、淡黄色，以及白至黄的各种中间色。气生菌丝直立、斜立或平贴于培养基表层，基内菌丝生于培养基内，菌丝直径1.5～3微米，有横隔膜，有明显的锁状连合现象，生长速度缓慢。在适宜温度和湿度条件下，菌丝在培养基表面会出现扭结的菌丝团，并逐渐胶质化，变成小原基，长成小耳片。双核菌丝移植后，或继续长菌丝，或迅速胶质化，或变成酵母状分生孢子。这些取决于菌龄、发育程度、培养基表面的游离水和机械刺激等因素。

②耳友菌丝的特征。初白色，常有特别细长的主干和侧生之分，略呈羽毛状的分枝。老菌逐渐变成浅黄、浅棕色，培养基逐渐由淡褐色变为黑色或黑绿色。培养基表面的气生菌丝呈灰白色、细绒状，有时有碳质的黑疤。分生孢子梗呈扫帚状，分生孢子少见，若产生时为黄绿色至草绿色，近椭圆形，直径3～5微米。在段木表面可形成扁平黑色的子座。已知羽毛状耳友菌丝决不单是1个种，可能有2个属3～4个种。

（2）两种菌丝组合方法

单一的银耳纯白菌丝或耳友菌丝在生产上必须经过两者混合培养后，才能形成高产优质的银耳子实体。其具体混合的方法有两种：

①在琼脂培养基上组合。如果是用芽孢进行混合培养，应先接种少许芽孢，待芽孢萌发形成银耳菌丝后，再接种耳友菌丝。如果是用银耳纯菌丝进行混合培养，应将一块带琼脂培养基米粒大的纯白菌丝，移到另1支琼脂斜面上，置22～24℃下培养5～7天，待银耳菌落直径达1厘米以上时，在其旁边接入一小点带琼脂培养基的耳友菌丝。在相同温度下继续培养7天左右，出现绣球状白毛团，10天后在白毛团上方出现无色或淡黄色水珠。耳友菌丝快速生长布满整个培养基，并分泌黑色素而使琼脂培养基底部呈黑色。这种混合菌丝体的银耳一级种，1支试管一般只接原种1瓶。

②在木屑培养基上组合。先提取纯白菌丝团连同琼脂培养基花生米大小，接入木屑培养基上；同时用接种针挑取耳友菌丝连同培养基小米粒大小，移接在菌种瓶的木屑培养基上，两种菌种块紧放一起。然后置于22～24℃培养15天左右，待耳友菌丝长至培养基3～4厘米深，瓶壁上可见黑色花纹，白毛团分泌淡黄色或浅褐色水珠时，继续培养5天，白毛团形成胶质化，出现淡黄色原基，并逐渐长出拇指大小的子实体时，即成木屑培养基一级种。