pcr的产物可以不可以直接拿来做模板再进行pcr

在进行第二次PCR之前要不要纯化？引物是一样的。

2024-12-23 08:24:10

推荐回答（5个）

回答1：

一般不建议这样做。除非你做巢式PCR。

以PCR产物作为模板，首先必须保证你的PCR产物经过纯化，成分单一，因此，无论怎样，第一轮PCR产物都要进行纯化，并且必须使用高保真酶以减少碱基错配的可能。这样才能以第一轮PCR产物为模板进行第二轮扩增。（用于巢式pcr）.

回答2：

这个主要是要看你第二次的PCR的引物和你第一次的是否一样
如果一样的话理论上可以但是效果很不好可以保证做不出来
如果不一样而且第二轮PCR的引物是在你的第一轮PCR产物内的
是可以做出来的而且不同纯化这个叫NESTED PCR

回答3：

当然~~可以啦

其实，PCR的产物，和你的原先的模版是一样的东西——复制品罢了

回答4：

可以，进行适当稀释后，直接作为模板，我做过，效果挺好，我是稀释1000-10000倍

回答5：

必须进行纯化，第一次PCR之后，进行电泳，用小刀将目的条带切下，做一个叫回收，这时你得到的DNA才是不含有有其它杂质片段的，可以作为模板。pcr反应有许多原因会造成反应的非特异性比方说引物的浓度过高使得引物与模版的非特异性结合等，就会产生非目的性的基因片段。必须电泳清除掉非目的性片段。