其实都可以,只不过直接扩增仅仅是目的基因,扩增后还是要连接到载体上,我认为连接到载体上后再扩增,只是为了方便吧.
连到载体后扩增有好处：载体相对于基因组或cDNA复杂度降低，扩增出的片段纯度比较高，而且循环数可以很低，如20-25循环
切忌用载体扩增时用高循环，否则会有大量smear
引物肯定需要加的！mg2+倒可以不加——我试过！
如果没有后续实验不建议连上载体，因为太费时费事
有问题再联系即可。
你的问题有点难以理解。
PCR怎么做要看你的目的啊，如果从基因组中扩基因，连个鸟载体，当然是直接扩增。如果你要获得全长序列，当然要载体，否则首尾的序列不可知。
至于“不加载体可以不加引物”就不知道你在说什么了。
PCR扩增的是重组基因 如果不将目的基因载入直接扩增 那不只是单纯的复制原来的基因了么
引物就是key 只有有了这个才能将目的基因载入为什么会想到是水呢
不连接到载体上你怎么扩增，养分呢
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