你好！我也做western有一段时间了很高兴和你探讨下这个问题我觉得该现象很可能的原因是转膜过程中出问题了，即1、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸（三明治组合）之间气泡没赶干净导致的。2、而条带特别不清晰就得看你的转膜时间了：转膜时间不够会导致胶上的蛋白包括mark没有完全转到膜上，转膜时间长了会导致胶上的蛋白包括mark已经穿过膜到滤纸上了。建议电泳后胶进行考马斯亮蓝染色、转膜后的膜进行丽春红染色以进行逐步检验问题出在哪。
确定是转膜不稳定造成的而不是电泳的问题？电泳后的条带正常？可能很多原因~转膜液离子强度不对~转膜电压电流不稳定~转膜仪的问题~一般来说湿转比半干转更稳定一些~只不过时间长~
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