稳定转染之后细胞荧光强度差异很大怎么办?

2024-12-14 11:11:50
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回答1:

理论和实际有差别是正常的。也许是受表达蛋白和GFP等荧光蛋白之间的相互影响,有时候,荧光强的细胞,你的目的基因的表达并不见的高,反而一些有荧光但荧光强度不高的目的基因的表达较高。你可以通过western blot去验证。
另外,稳定克隆也不是能使用下去,即使你一直使用筛选药物,如G418,因为随着传代的增多,会有丢失导致表达量下降,因此,稳定克隆在传6-7代以后或许就应该重新筛选。
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