培养灰树花菌种时采用蒸汽锅炉灭菌的注意事项是什么？

（1）灭菌的工作人员不能离开工作岗位，必须达到有效灭菌时间。

（2）经常观察水位变化，根据锅内水位变化，及时地向锅内补充水分，严防把锅内水烧干导致损坏菌袋。同时又要注意不要频繁加入冷水，致使蒸汽始终不能大量产生；最好冷水一次性加至上限，然后大火猛烧促进快速产气，直到下限时再加水，中途不加冷水，保持供应蒸汽时间较长。此外，使用直热式灭菌锅或锅炉，在达到计时停火后往往余热还可以把锅内水烧干，注意停火后1～2小时内仍需加水1次防止干锅发生。

（3）开始大火升温，计时后小火维持，保持灭菌时间内温差不超过5℃。

（4）放气管外口开放，自有冷空气排出，待放气口冲直气流30厘米以上时，冷空气已放完，可用塞堵上。如果塑料布鼓的过高，可拔掉木塞放气降压，已达稍平为准。高压灭菌锅灭菌时，按说明书准时排放冷空气和计算灭菌时间。

（5）不论采用何种灭菌方式，达到灭菌计时温度以后，如遇到特殊情况，耽误了灭菌时间，要按照缺一补二的原则延长灭菌时间，确保灭菌效果。

（6）灭菌场地最好靠近接种室，缩短灭菌后的菌袋运输距离，减少外界环境所引起的再次污染机会。

（7）灭菌区域要远离生产原料堆放处和各种肥料堆放的地方。

（8）灭菌以后的菌袋搬运过程中，所接触到的工具设备等，都要在使用之前进行消毒处理，工作人员的手也要用0.2%高锰酸钾或2%来苏儿水溶液洗涤消毒。在搬运到冷却室或接种室门前，设一个1米2左右的消毒道，表面撒上一层石灰粉，用于来往行人鞋底消毒。