1.不同真菌的ITS片段大小是不一样的,大小在500-750bp之间,个别在1000左右2.土壤样品的DNA提取物用ITS1和ITS4这对引物扩增在500-750bp大都有2个目标条带是正常的,因为土壤中的真菌种类很多,所以条带会多,而且普通电泳无法区分,所以用切胶回收做克隆测序的话,也会得到很多真菌,而不是单一的,我觉得做克隆测序是可以的