是4度吧。。放4度是抑制其生长。。若放在-20度，虽然经过转化后复苏，细胞是有些恢复了活性，但是毕竟还是很脆弱，-20度冷冻细胞，然后再解冻使用的话，很容易使细胞死亡的，加之如果本来细胞的转化效率就不是很高的话，可能再次涂板的结果是没有菌落长出。。。
一般，我们做实验，剩余对的菌液是不会再用的，一是不靠谱，二是若是涂的板没长单菌落的话，那么这个剩余的菌液也就没什么作用了：若是长出了，大可以抽提质粒，下次用时再转，或者摇菌后用甘油保种，下次用时可选择划线，也可以直接摇菌。。。
个人感觉那个剩余的菌液，不存也罢。。不知道你那边存起来时为了？？？
为什么要保存？都涂上不就完了，如果转化率较高，不必用离心，吸取200微升涂上就行了，转化率低的时候离一下心倒掉上清留一两百微升涂板。一般4度短时间保存，-20度长期保存。菌液反复冻融会影响菌种活力。如果一两天内就要用还是放4度好。
没有甘油 冻死了
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