浓度不是问题，关键是你要加入足够量的DNA。具体来说，载体与目的片段的摩尔比要为1比3到1比10。一般市场上的T载体大约是0.03pmol/ul的浓度，也就是说你要加入0.06-0.3pmol的插入片段。对于1000bp左右的线性DNA分子，0.3pmol时的量约为200ng。目的片段浓度太低的话，你可以扩大连接体系来做。
一般回收后取1微升产物电泳能看到明亮清晰的带，这时的量就足够。
