高效液相色谱中怎样改善条件达到分离度要求

（1）选择合适的流动相，使其流经色谱柱时，受到的阻力减小，从而能迅速通过色谱柱，且必须对载液加高压。

（2）可选择合适的固定相和流动相以达到最佳分离效果。高效液相色的分离效果比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

（3）定时清洗柱子。高效液相色谱的柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物。但是要定时清洗柱子从而分离度。

扩展资料

高效液相色谱法的特点：

高效液相色谱法有“四高一广”的特点：

（1）高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

（2）高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

（3）高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

（4）高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

（5）应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

（6）柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物

（7）样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。

参考资料来源

百度百科-高效液相色谱

百度百科-分离度

要改善的条件很多，介绍几种供参考
1、色谱柱，色谱柱使用时间长了，柱效会降低，会影响到分离度的，改善方法是更换新的色谱柱。如果已经是新的色谱柱了，分离度还不好，那可以采用更长一些的色谱柱，也会增加分离度。
2、流动相的调节，通过调节流动相中各组分的比例，使流动相的极性发生变化，分离效率会不一样，这要针对要检测的成分具体情况进行分析确定。
3、改变柱温，相同条件下升高柱温，会增大色谱柱的分离能力而提高分离度。

1、减小固定相颗粒直径（3-10um）
2、降低流动相粘度或提高柱温
3、一定范围内减小流速（多用1ml/min）
4、提高装柱技术（常采用匀浆法）
5、减小柱外死体积（减少样品在此部分的扩散）

液相色谱改善分离度的一般是：色谱柱、流动相、柱温、流速等方面。
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