需要注意的问题很多，加材料时需注意，因为培养不同的菌需要的物质不同；然后就是调节pH值；在灭菌过程中也需要注意，先是加水，要浸没电阻丝，三脚架平齐处，然后就是安全阀，排气阀的使用以及判断冷空气是否排尽等。 关键操作是调pH 和灭菌· 因为pH不同，会影响微生物的生长，再就是灭菌不完全，会有杂菌。
培养基配制称量要准确。溶化时要搅拌，防止受热不均匀溢出来了。PH值的调节。
