不知道序列,知道是什么基因的话,可以根据物种之间的同源性在保守区域设计引物,然后再用race等技术扩全长,如果基因名字什么都不知道的话。。。那就图位克隆。。
不知序列如何知道的基因?不知全长的可以做RACE,设计兼并性引物,如果什么序列都不知道,还真没办法设计引物。
在RT时,引物设计有3种方法即a:Random 9mers;b:Oligo dT-Adaptor Primer;和c:特异的下游引物。如果用a和b方法,是扩增的所有的cDNA(理论上),还要用此产物做PCR 的模板继续扩增。