RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体，没有目的条带，更换引物了也这样，求高手解答原因啊！高分

1. 楼上说的都很有道理。不同的Taq确实效果很不一样。在我所使用过的几十种酶中，发现凡是遇到困难的模板，Qiagen 的HOTSTART MASTER MIX PLUS一般都可以得到产物，所以我强烈推荐（可以试试配合Q SOLUTION一起使用，一般免费索取）
2. 另外就是，你的目标基因的表达量是不是很低？你的PCR目的是什么？建议先找一个表达丰度高的体系，验证一下你的引物是否工作。对于极低表达丰度的目标，一轮PCR很有可能得不到产物，这是建议使用NESTED PCR，就是设计2套嵌套的引物，第一轮先用外面的那对，理论上可以得到一个比较大的产物（跑胶不一定能看到），然后稀释PCR产物50倍，再用里面那对引物扩一次，一般可以得到跑胶看得见的产物量。
3. 关于引物设计，推荐使用Primer3 plus，这是免费的网上设计软件，很好用。比你用的那2种引用次数多很多。你Google一下就可以了。

个人觉得mix质量一般，mix一般是用来做检测用的，比如说提取出来了质粒做克隆鉴定啊，或者是转基因动物做基因型鉴定用的。你要用cDNA做模板的话，建议用专门的PCR的酶，这样也可以改体系中的不同组分，比如说可以把Mg离子浓度提高一些。
我建议你改用好一些的Taq酶去PCR试试，比如说LA Taq，Primer Star或者PFU什么的，保真度高。另外，你也可以试试把退火温度再降低一下，你的退火温度是在引物的Tm值附近的吗？

不要用mix试试吧！

用Taq DNA buffer、dNTPs、Mg2+、引物、TaqDNA聚合酶试试。

退火温度在40到70度间都试试。可能是退火温度已经太低了所以出现杂带。