工作原理
类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火(复性)--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时 聚合酶链式反应间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,于72℃左右,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
【DNA模板】就是一段双链DNA,里面有你想要扩增的一小段基因(目的基因),那么DNA模板是有脱氧核苷酸序列的,所以 获取目的基因 的 前提是要有 一段已知目的基因的核苷酸序列
参考资料是百度文库的 要更深入了解整个技术可以看视频 或图解
如果你不知道模版的序列,你的引物又如何设计呢?当然随机引物也可以,但是那样得到的产物不纯,而且是否是你所需的目的产物也不可知。
你看一下高中生物新课标选修3就知道了。需要有引物参与!而且引物将会成为DNA链上的一部分。
是已知目的基因的脱氧核苷酸序列~~~