可以，只要你的PCR扩增特异性够强，没有杂带。这其实就是理论和实际的差距，因为表达载体的扩增效率低，如果一次实验不成功，你还要从PCR步骤做起重新收集DNA，而如果克隆至扩增载体，每次只需扩增质粒回收DNA即可。
可以的，但是效率不高，目的片段测序的时候也不能用通用引物了，会不太方便。
可以的！
