A、在肺炎双球菌的转化实验中，证明了DNA是遗传物质，因此将S型菌的DNA与DNA水解酶混合，DNA分子就会被水解，失去遗传效应，不能将R型细菌进行转化，故A正确；
B、用含有35S标记的噬菌体去感染普通的大肠杆菌，短时间保温，离心获得的上清液中的放射性很高，说明蛋白质没有进入大肠杆菌中，没有起遗传物质的作用，故B错误；
C、用从烟草花叶病毒分离出的RNA浸染烟草，烟草出现病斑，说明烟草花叶病毒的RNA可能是遗传物质，故C正确；
D、将已用15N标记DNA的大肠杆菌，培养在普通（14N）培养基中，经三次分裂后，形成子代8个，由于半保留复制，含15N DNA分子是2个，占DNA总数的
，故D正确．1 4
故选：B．
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