看你的引物是否落在别的基因上,类似于同源性blast。有两个方法可以来判断1.NCBI工具_Primer-BLAST——NCBI的引物设计和特异性检验工具 NCBI工具_Primer-BLAST——NCBI的引物设计和特异性检验工具 2.ucsc 网站进行primer blast 。
有专门的网站可以提供这个匹配,或者自己用BLAST什么的拿引物的序列去基因组里匹配一下就可以了吧大概。其实个人认为即使不是特异的,如果假阳性是长度更大并且差很多的序列在PCR时的影响不会太大