不知道你想问什么?
先看pCAMBIA1304两个ORF的酶切位点,然后切一个,用来做vector
接下来就一步一步先把GGFPS转入质粒中,再切一个,再转入FPS
说的具体点(根据实际情况可能有不同)
先看pCAMBIA1304上的两个ORF的两个酶切位点是什么,然后再看你要插入的片段有没有这两个酶切位点,举例,你想先将GGFPS插入到第一个ORF中,那先看第一个ORF的两侧有什么酶切位点并且GGFPS也有,这样,你可以通过PCR先将insert(插入片段)根据酶切位点扩增出来,再来将质粒第一次酶切,然后也将insert酶切,暴露其粘性末端,然后就可以连接了。
同理可以插入第二个insert。