配制50mmol/L 的Tris-HCl缓冲溶液,可以按照以下步骤进行:
称量Tris碱的质量。根据摩尔浓度,需要称取约6.055g的Tris碱。
将称取的Tris碱加入到1L的烧杯中,并加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
加入浓盐酸调节所需要的pH值。使用浓盐酸是因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
将溶液定容至1L。
高压高温灭菌后,室温保存。
也可以先配制1M溶液(此时称量为121.1g,其他步骤不变),使用前再稀释至所需浓度。
如果配制一升溶液,那么需要Tris的质量是:
121*0.05=6.05克,
即称取Tris6.05克,与水配制成一升溶液,有条件的向溶液内充入氯化氢,没有条件的滴入浓盐酸,调整到所需要的PH值即可。