请教pH=8.0,10mmol⼀L的Tris-Hcl缓冲液如何配制

2024-11-23 21:29:43
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回答1:

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  10 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)
  1 mmol/L EDTA(pH 8.0)
  因为含有以上两种物质,所以称为TE。
  配制分三步:
  1) 1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml的配制:称取Tris碱6.06 g,加超纯水40 ml溶解,滴加浓HCl约2.1 ml调pH至8.0,定容至50 ml。
  2) 0.5 M EDTA(pH 8.0)50 ml的配制:称取EDTA-Na2·2H2O 9.306 g,加超纯水35 ml,剧烈搅拌,用约1 g NaOH颗粒调pH至8.0,定容至50 ml。(EDTA二钠盐需加入NaOH将pH调至接近8.0时,才会溶解。)
  3) 1×TE(10 mM Tris-HCl,pH 8.0;1 mM EDTA,pH 8.0)的配制:
  作用:
  TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在它是的稳定性较好,不易破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液是保存. 10mMTris-Hcl,pH有7.4\7.6\8.0三种。
  EDTA调到8.0是为了更好溶解,其他只要调到相应pH就可以。Tris在7-8附近缓冲能力很强,所以加8.0的EDTA下去后,不会改变pH。

回答2:

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配制升溶液需要Tris质量:
121*0.05=6.05克
即称取Tris6.05克与水配制升溶液条件向溶液内充入氯化氢没条件滴入浓盐酸调整所需要PH值即