①萨顿运用类比推理法提出基因位于染色体上的假说,并没有采用同位素标记法,①错误; ②格里菲思肺炎双球菌体内转化实验中,没有采用同位素标记法,②错误; ③鲁宾和卡门采同位素标记法,证明光合作用释放的氧气来自水,③正确; ④卡尔文采用同位素标记法,发现光合作用过程中的碳循环途径,④正确; ⑤用于放射性同位素标记氨基酸,可用于分泌蛋白合成和运输过程的研究,⑤正确; ⑥恩格尔曼运用水绵和极细的光束证明叶绿体是进行光合作用场所,但并没有采用同位素标记法,⑥错误.故选:C.