微生物限度检查法

再拿出来使用的话，如果时间不长，比如一周或半个月，可以直接使用，如果时间长了，建议活化后再用。
先活化转第二代后再使用。
培养方式，都可以，直立或者平放。
等到菌都长好了，就可以放到冰箱里，一般细菌长的都比较快，24小时就差不多了。

从微生物保藏中心买回来的菌种一般为冻干品，也就是你所说的安瓿瓶包装，其为0代原始菌种，这个是非常贵的。如果是一般机构，我觉得你还是在当地药检所（一般市以上药检所均有售）就近购买，一般就几百块一支菌种（一般为菌种斜面）。

如果是菌种斜面，你可以采用低温斜面保藏法进行传代与保藏，方便又快捷，比较省事，但是其缺点就是传代频繁易变异。

一般来说新购入的菌种应该先进行传代，再使用工作菌种。

斜面保藏法，菌种传代后放入培养箱，一般培养18到24小时，白色念珠24到48小时，黑曲霉5到7天即可。培养时，菌种斜面摆放方式一般没什么特别的要求，不过斜放最好。

如果菌种放入4度冰箱，用时需放入室温后再进行使用即可。

微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌素、酵母菌数及控制菌检查。
微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。
供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物的生长和存活无影响。
除另有规定外，本检查法中细菌培养温度为30～35℃，霉菌、酵母菌培养温度为25～28℃，控制菌培养温度为36℃±1℃。
检验结果的报告以1g、1ml、10g、10ml或10cm<2>为单位报告。
检验量
检验量即一次试验所用的供试品（g、ml 或 cm<2>）。
除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml；中药膜剂为50cm<2>；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验应增加10g或10ml。
检验时，应从2个以上最小包装单位中抽取供试品，大蜜丸还不得少于4丸，
膜剂还不得少于4片。
一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量供试品。
供试液的制备
根据供试品的理化特性与生物学特性，可采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需用水浴加温时，温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时。
除另有规定外，常用的供试液制备方法如下。
1.液体供试品
取供试品10ml，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液。油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80使供试品分散均匀。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
2.固体、半固体或黏稠性供试品
取供试品10g，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，用匀浆仪或其他适宜的方法，混匀，作为1：10的供试液。必要时加适量的无菌聚山梨酯80，并置水浴中适当加温使供试品分散均匀。
3.需用特殊供试液制备方法的供试品
(1)非水溶性供试品
方法1 取供试品5g(5ml),加入含溶化的（温度不超过45℃）5g司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45℃左右的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，边加边搅拌，使供试品充分乳化，作为1:20的供试液。
方法2 取供试品10g，加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯（制法见附录XIII B无菌检查法中供试品的无菌检查项下）和无菌玻璃珠的适宜容器中 ，必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量，充分振摇，使供试品溶解。然后加入45℃的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇5~10分钟，萃取，静置使油水明显分层，取其水层作为1：10的供试液。
（2）膜剂供试品
取供试品100cm2，剪碎，加50ml或100ml的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（必要时可增加稀释液），浸泡，振摇，作为1：10或1：20的供试液。
(3)肠溶及结肠溶制剂供试品
取供试品10g ，加pH6.8无菌磷酸盐缓冲液(用于肠溶制剂)PH7.6无菌磷酸盐缓冲液（用于结肠溶制剂）至100ml，置45℃水浴中，振摇，使溶解，作为1：10的供试液。
（4）气雾剂、喷雾剂供试品
取规定量供试品，置冰冻室冷冻约1小时，取出，迅速消毒供试品开启部位，用无菌钢锥在该部位钻一小孔，放至室温，并轻轻转动容器，使抛射剂缓缓全部释出。用无菌注射器吸出全部药液，加至适量的PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（若含非水溶性成分，加适量的无菌聚山梨酯80）中，混匀，取相当于10g或10ml的供试品，再稀释成1：10的供试液。
（5）具抑菌活性的供试品

详细请参考http://www.xy-bio.com/xy-bio_Article_192403.html

细菌一天番几亿倍呢，2周就够了

后一个大概20小时