我现在高二,正在做植物组培实验。
虽然还没看到愈伤组织(接种后第三天),但恐怕有的已经被微生物感染了。
严格做到无菌并不容易,所以要大量实验(做好失败的心理准备)。
要知道MS培养基的成分不仅适用于植物,而且也适用于微生物。微生物抗逆境能力强,无处不在,所以要从多方面降低被微生物感染的几率。具体如下:
1.配置MS培养基时,器具、母液都要高压蒸汽灭菌。
2.接种前要依据不同植物以及植物器官的不同,做相应的处理。例如:我现在做非洲紫罗兰,就先要用洗涤灵初步洗涤,用毛笔刷掉附着在植物体上的异物,清水漂洗,75%酒精溶液浸泡25s,再次漂洗,2%次氯酸钠溶液浸泡15min,最后在漂洗五次,才能接种。(还可以用氯化汞、次氯酸钙、双氧水进行消毒,也有使用抗生素的,不过抗生素会对有的植物体有些副作用)
3.接种在超净工作台上进行,使用前使用紫外灯照射半小时,并打开空气净化和循环设备。
4.操作员身着白大褂,换好拖鞋,接受风淋,吹落灰尘才可进入工作台。用酒精将台面、手进行消毒。接种过程中的镊子、刀片等都要在酒精灯上灼烧灭菌。当然,接种全程要在酒精灯旁进行。
5.培养室要注意空气流通。
如图,被感染的植物
如果不进行无菌操作,那培养出来的就不是植物而是细菌了。
操作前对培养基、培养设备进行杀菌处理,操作过程中也要保持无菌条件。
因为细菌会破坏组织,操作前应该杀菌消毒
微生物繁殖会消耗营养、产生毒素,导致植物组织培养失败。
愈伤组织非常脆弱,有异物很容易影响分化
把培养用具进行无菌处理,可以高温、放线处理
在培养液中加入一定量的抗生素防止培养过程的污染
要定期更换培养液以便清除代谢废物防止细胞代谢产物积累对细胞造成自身伤害
对于进入培养实验室的人员进行光照杀菌处理
进行实验时要佩戴手套、口罩、白大褂……
而且通入的空气也要是无菌的。