双缩脲试剂为什么能鉴别蛋白质

当脲被小心地加热至 150～160℃时，可由两个分子间脱去一个氨分子而生成二缩脲（也叫双缩脲）。

双缩脲与碱及少量硫酸铜溶液作用生成紫红色的配合物，此反应称为双缩脲反应：

由于蛋白质分子中含有肽键（-CO-NH-），与双缩脲结构相似，故也能呈现此反应而生成紫红色配合物，在一定条件下其颜色深浅与蛋白质含量成正比，据此可用吸收光度法来测定蛋白质含量，该配合物的最大吸收波长为560nm。本法灵敏度较低，但操作简单快速，故在生物化学领域中测定蛋白质含量时常用此法。本法亦适用于豆类、油料、米谷等作物种子及肉类等样品测定。

具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。
因此，看到颜色变化就能鉴别蛋白质

双缩尿是由两分子尿素缩合而成的化合物，在碱性溶液中能与硫酸铜反映产生紫红色络合物，此反应称双缩脲反应。蛋白质分子中含有许多和双缩脲结构相似的太监，因此也起双缩脲反应，形成紫红色络合物。

鉴定蛋白质的原理是：在碱性条件下，蛋白质与CuSO4 发生络合反应，产生紫色络合物。所以要先加NaOH，再加CuSO4.

参与反应的是硫酸铜，氢氧化钠溶液只提供碱性环境，蛋白质中的肽键和双缩脲结构形似，能发生双缩脲反应，形成紫色物质。凡分子中含有两个以上—CO—NH—键的化合物都呈此反应，蛋白质分子中氨基酸是以肽键相连，所有的蛋白质都能与双缩脲试剂发生反应。