可以这样来说吧，首先你应该有一条已知的序列，反向引物设计时在序列的5'方向找一段序列然后反向互补作为反向引物，在3'方向直接找一段序列作为正向引物。这样就OK了，这是引物的设计，至于其他条件可以参考相关文献.
cdna是单链，做race分3‘端和5’端两种情况。同时真菌与细菌mrna有差别。因此，设计race引物是有学问的。根据你自己的情况，好好设计吧。祝好运！
在已知序列上游设计反向引物，在下游设计正向引物。
反向PCR
http://baike.baidu.com/view/896324.html?wtp=tt
把你的序列反向互补后再搜一边
和正向引物一样的啊，软件上都可以完成的
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