PCR目的DNA片段较浅,引物二聚体很亮是什么原因

2024-12-24 22:46:20
推荐回答(3个)
回答1:

如果没有杂带,只是目的条带不亮,就不是特异性问题,而是扩增效率较低。可能是引物结合不好,或者两个引物退火温度差异过大等原因。可以先试一试降低退火温度,增加循环数。提高模板浓度,或回收后再次扩增也可以试一试。如果要求不是很高,这样优化一下就差不多了。

回答2:

那就要问你怎么设计的引物咯

设计没有办法优化的话就增加模板的用量,减少Taq和引物的量。
还有,既然你有目的条带,割胶回收一下,再拿这点DNA做二次PCR,特异性会好点。

回答3:

引物不特异呗