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PCR后进行DNA电泳跑的条带是一条，但不是我想要的条带，是怎么回事啊？

2024-12-13 23:17:43

推荐回答（4个）

回答1：

你的结果上的“一条带”位置在哪里？我想你能确定不是目的带的话，那应该结果显示的条带比较靠前，DNA长度较小。

那很有可能是引物二聚体。出现这个情况，可能的原因有3：
1。引物本身不对，不是目的DNA扩增需要的引物。

2。DNA回收提纯的问题

3。PCR体系内镁离子浓度问题。。。

建议排查下各项。

回答2：

首先，你是怎么确认不是你要的条带？有没有marker？marker有时候也靠不住，最好是有阳性条带作为对照，胶的浓度对同分子量的不同物质的迁移率有影响，所以不要太相信marker。

如果确认无误不是目的条带，鉴于你只有一个条带，这就不是什么非特异扩增的问题，而是你引物设计的时候就不对了。

回答3：

出现的是非特异性条带，可以调整退火温度试试看，不行的话就是引物没设计好。

回答4：

测序吧，你的理论大小和实际大小存在偏差的。