为什么PCR产物末端有A？

2024-12-14 01:02:21

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回答1：

因为PCR用的DNA聚合酶无5 ' 到 3 ‘外切酶的活性，校对功能较差，而具备在dNTP过量时，在产物末端添加A，故PCR产物末端有A，若扩增PCR产物较长，需要高准确率时，采用高保真酶，末端不加A
而高保真酶扩增产物要连TA克隆时，可加入Taq酶，在产物末端加A
因为一般PCR采用的是Taq酶扩增，产物末端都有A

回答2：

是和用来进行PCR的酶有关，一般用的普通Taq酶（如Takara 的 rTaq）没有3‘-5’校正功能，有了部分末端转移酶（A，T）的活性，所以PCR产物末端一般有个A；
但是用高保真的酶如pfu等，PCR产物末端没有A

回答3：

Taq酶自动加上的。用高保真酶就没有。