恩,原始的方法是PCR产物与变性缓冲液混合,95或98度变性5到10分钟.变性缓冲液中含有甲酰胺,是一种变性剂.后来出现了核酸外切酶,PCR产物酶切成单链再跑,变性不变性效果可能一样的,不过酶有点贵.我做的是SSCP,跑单链.DGGE好象跑的是双链.
是的,PCR产物进行聚丙烯酰胺电泳之前需要变性,使双链的DNA变为单链