阻断ELISA与液相阻断ELISA有什么区别？

一、本质不同：

间接的酶标抗体是二抗，与待检抗体结合；阻断酶标抗体是一抗，与抗原结合。间接中底物降解的量与抗体量相等，阻断底物降解量与抗体。

二、实验结果不同：

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) ：是酶免疫测定技术中应用最广的技术，其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，常用的ELISA法有双抗体夹心法和间接法。

OD值不同是因为前后样液的浓度不同，所以透光率也不一样，但是前后的OD值都是表示同一种物质在不同浓度时的OD值，只是相对在0.2-0.8范围内比较精确而已。

三、用途不同：

ELISA更为简便实用和标准化,从而使其成为最广泛应用的检测方法之一，目前ELISA方法已被广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断，在动物检疫方面，ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。

用于标记的酶 用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室温下稳定；反应产物易于显现；能商品化生产。目前应用较多的有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP应用最广。

扩展资料：

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，此种结合不会改变抗体的免疫学特性，也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。

因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，颜色反应的深浅与标本中相应抗体或抗原的量呈正比。此种显色反应可通过ELISA检测仪进行定量测定，这样就将酶化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性结合起来，使ELISA方法成为一种既特异又敏感的检测方法。

参考资料来源：百度百科-酶联免疫吸附试验

• 概念上有本质不同，不过结果都是一个目的，可以借鉴

• 阻断ELISA：

• 又叫竞争ELISA,我以间接竞争ELISA为例介绍!首先包被猪瘟人工抗原4度过夜,3%脱脂牛奶封闭1H后,加入你需要检测的猪瘟样品及猪瘟提纯标准抗原50微升,再加入猪瘟抗体50微升,混匀,反应1H,再加入酶标记的抗猪瘟抗,反应1H,加入底物显色,根据标准曲线,及OD值,得出样品中的含量,样品中猪瘟含量越高,OD值越小!

• 液相阻断：

• ELISA其实就是将抗体（兔抗血清）包被在ELISA板中,于此同时将待检血清做几个稀释度和已知抗原在反应板中反应；4°过夜,然后将ELISA板中包被的抗体弃掉,洗板；将反应板中一定量的反应液加入ELISA板中,37°1h；然后弃液,洗板,加入一定量的一抗（豚鼠抗血清）,与所剩抗原结合,37°1h；然后弃液,洗板,加入一定量的酶标二抗（兔抗豚鼠血清+酶标记物）,37°1h；然后弃液,洗板,加入配好的显色液,37°显色10-20分钟左右,加入终止液读数.

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