POD过氧化物酶活性(参考Chance等[11]的方法)
A. 酶液制备0.25g芽(剥除鳞片),加入0.0lg PVP, 5mL 0.lmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.8,含有0.2mmo1/L EDTA, 0.4mmo1/L β-巯基乙醇)冰浴研磨,低温(4℃).12000r/min离心10min后,所得上清液为待测液。
B. POD溶液制备:在50mL 100mmol/L pH7.0的磷酸盐缓冲液中加入19uL愈创木酚,加热搅拌,溶解冷却后加入28uL 30%的H2O2即为POD反应液,放到冰箱保存。
POD测定:酶液稀释10倍,取50uL待测液与2mL POD反应液和1mL 0.2mo1/L的磷酸二氢钾溶液反应,用紫外分光光度计于470nm处每隔30sec测其吸光值A470,重复3次求平均值,以△A470/min/gFW表示酶活大小。