分子杂交如何检测转录？

2024-11-30 17:48:46

推荐回答（2个）

回答1：

检测目的基因是否导入用的是dna-dna分子杂交，检测是否转录用dna-rna分子杂交，检测是否翻译用抗原-抗体杂交。
前两者都是通过一条被标记的dna单链作为基因探针来实现的。这个探针具体的做法就是：用目的基因转录出的mrna为模板，以被放射性同位素标记的脱氧核苷酸为原料，用逆转录的方法合成一条被标记的dna，然后把模板的mrna给水解掉，这样就得到一条被标记的dna单链，这就是探针。它的特点就是可以和目的基因转录的mrna互补配对（即能形成杂交带），所以把探针放在受体细胞中如果发现有杂交带产生，就说明目的基因转录了。
另外，这个探针也可以用来做dna-dna分子杂交，即检测目的基因是否导入，方法：先取出受体细胞中dna然后高温变性成单链，把探针放进去，然后降温复性，如果形成杂交带说明，这些dna中有能和探针互补的dna片段，即目的基因。因为这个探针本身就是由mrna逆转录来的，它的碱基序列与目的基因的一条链完全相同，当然就可以和另外一条链刚好互补了。
这样可以吗？

回答2：

转录：DNA
转录mRNA，如果标记的目的基因能表现出来，说明有对应的mRNA，即转录成功。