引物上的碱基不是每一个都必须与模板链互补配对的,但是像你图上所示的那种设计是不行的,一般引物的5‘端可以完全不与模板一样,这样你可以在PCR中引物酶切位点等,但是3’端必须是与模板链结合的,因为Taq酶是按5-3方向延伸的,3‘端如果翘起的话,是不能延伸下去的,如果你的引物3’端一段与模板下游某处能结合,那就变成了deletion某段的PCR了