跪求鱼类红细胞裂解方法

鱼类的红细胞是有核的且一般保持球形状态。人类红细胞保持双凹或单凹的状态主要是增加表面积与体积比。大自然这样设计有两个好处，一是占较小的空间，又有较大的表面积，有利于与周围血浆充分进行气体交换，保证体内有足够数量的红细胞而不显得拥挤，而且运送最多的物质量。

鱼类的红细胞是有核的且一般保持球形状态。人类红细胞保持双凹或单凹的状态主要是增加表面积与体积比。大自然这样设计有两个好处，一是占较小的空间，又有较大的表面积，有利于与周围血浆充分进行气体交换，保证体内有足够数量的红细胞而不显得拥挤，而且运送最多的物质量。二是有利于红细胞的变形。我们知道人类毛细血管直径一般为6—8微米，显然比红细胞的直接要小，红细胞要通过毛细血管只有变形通过，传统认识认为红细胞的双凹圆盘形细胞有较大的表面积与体积之比。此比值越大，越易于变形，故红细胞能卷曲变形，以此适应通过直径小于它的毛细血管并能通过脾和骨髓的血窦壁及其膜孔隙，通过后再恢复原状。

红细胞裂解液的配制
2007-10-14 17:45:06 本文已公布到博客频道校园·教育分类
我在一个公司的网站上看到的红细胞裂解液的说明书上说操作要点是：1.在37度预热；2.充分混匀细胞我就是这样做的，效果还可以。不过我只做流式细胞仪的检测，活性没测。我的裂解液是0.16M NH4Cl， 0.13mM EDTA， 12mM NaHCO3

我用的方法：

全血：裂解液=1：3，如2ml的全血加上6ml的红细胞裂解液，充分混匀后，室温静置5mim，1000rpm离心6~10min。红细胞裂解得非常充分。

0.15 M NH4CL, 0.01 M NaHCO3 and 1 mM EDTA (Sigma)

Ammonium chloride (NH4Cl) 8.29 g 0.155 M
Potassium bicarbonate (KHCO3) 1 g 10mM
EDTA 0.37 g 1mM
H2O 1l.
Filter with 0.45µm filter
aliquot in 100 ml aliquots
filter the solution to be used with 0.2µm filter.

我们用的是Tris-NH4Cl,
具体配方如下:
NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml;
Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌,
用时加10-20ml,静置5min,效果蛮好.

9月29日我用的配方

氯化铵3.735g，tris 1.3g，加在500ml水中，ph约7.2。

将全血约5ml加入配好的加入30ml裂解液的50ml试管中5分钟或15分钟，发现5分钟组细胞要多些，15分钟组细胞要少些，而且红细胞仍然有。